Synteza kwasu żółciowego w izolowanej, rozdrobnionej wątrobie królika

Eksperymenty te przeprowadzono w celu wykazania przydatności perfundowanej wątroby królika do badań nad metabolizmem kwasów żółciowych oraz w celu określenia enzymu ograniczającego szybkość syntezy kwasów żółciowych. Króliki karmiono półsyntetyczną dietą, z dodatkiem 1% kolestyraminy lub bez niej, w kontrolowanych warunkach. Pod koniec 2-5 tygodnia, wątroby usunięto i perfundowano przez 2,5 godziny, stosując różne prekursory znakowane izotopem 14C do pomiaru syntezy kwasu cholowego de novo. Wątroby następnie analizowano pod kątem cholesterolu, a żółć zebraną podczas perfuzji analizowano pod kątem cholesterolu i kwasów żółciowych. Kontrolna żółć zawierała średnio 0,34 mg glikocholanu, 7,4 mg glikodeoksycholanu i 0,06 mg cholesterolu. Read more „Synteza kwasu żółciowego w izolowanej, rozdrobnionej wątrobie królika”

Immunoheterogeniczność hormonu przytarczycznego w surowicy żylnej z hiperfunkcji przytarczyc

Immunoreaktywny hormon przytarczyczny (iPTH) w osoczu człowieka z nadczynnością przytarczyc składa się głównie z karboksylowych (COOH) – końcowych fragmentów tego hormonu. Chociaż uważa się, że te fragmenty powstają głównie lub wyłącznie z obwodowego metabolizmu nienaruszonego ludzkiego PTH {hPTH (1-84)} wydzielanego z gruczołu przytarczycznego, istnieje niezgodność co do źródła fragmentów iPTH in vivo. Aby ponownie zbadać to pytanie, frakcjonowaliśmy surowice krwi obwodowej i tarczycy lub żyły przytarczyc żylnych od czterech pacjentów z pierwotną nadczynnością przytarczyc przy użyciu systemu filtracji żelowej o wysokiej rozdzielczości (kolumny Bio-Gel P-150 prowadzone przez przepływ zwrotny). Ścieki z kolumny zanalizowano przy użyciu dwóch testów radioimmunologicznych PTH, jeden skierowany w kierunku regionu aminowego (NH2) – końcowy region cząsteczki, drugi w kierunku regionu końcowego COOH. We wszystkich czterech surowicach tarczycy lub paratyroidach pobierano żylne surowicy, iPTH był 9-180 razy większy niż w surowicy obwodowej od tego samego pacjenta; po frakcjonowaniu, hPTH (1-84) stanowiło tylko część całkowitego iPTH (35-55% z testem skierowanym w kierunku końca COOH regionu hPTH,> 90% z testem ukierunkowanym na koniec NH2). Read more „Immunoheterogeniczność hormonu przytarczycznego w surowicy żylnej z hiperfunkcji przytarczyc”

Dystrybucja receptora naskórkowego czynnika wzrostu w ranach oparzeniowych. Implikacje dla naprawy za pośrednictwem czynnika wzrostu.

Naskórkowy czynnik wzrostu (EGF) wraz z kilkoma pokrewnymi peptydowymi czynnikami wzrostu pokazano zarówno in vivo, jak i in vitro, aby przyspieszyć zdarzenia związane z naprawą rany naskórka. EGF i transformujący czynnik wzrostu alfa działają przez wiązanie się ze wspólną kinazą tyrozynową receptora EGF, inicjując w ten sposób szereg zdarzeń, które ostatecznie regulują proliferację komórek. W badaniu tym badano immunohistochemiczną lokalizację receptora EGF (EGF-R) w ranach rany oparzeniowej, sąsiadującym nabłonku proliferacyjnym i ściśle związanych kanałach potowych, gruczołach łojowych i mieszków włosowych. Próbki tkanek usunięte podczas chirurgicznego oczyszczenia uzyskano z ran oparzeń o pełnej i częściowej grubości u 32 pacjentów, z oparzeniami całego ciała w zakresie od 2 do 88%. We wczesnym okresie postburn (dni 2-4) wybitne wybarwianie EGF-R stwierdzono w niezróżnicowanych, marginalnych keratynocytach, sąsiadującym proliferującym, hipertroficznym nabłonku, i zarówno marginalnych i niemarginalnych mieszków włosowych, kanałach potowych i gruczołach łojowych. Read more „Dystrybucja receptora naskórkowego czynnika wzrostu w ranach oparzeniowych. Implikacje dla naprawy za pośrednictwem czynnika wzrostu.”

Korekta wytwarzania interleukiny-2 u pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym przez usunięcie spontanicznie aktywowanych komórek supresorowych.

Produkcja interleukiny-2 (IL-2) in vitro ulega depresji u chorych na toczeń rumieniowaty układowy (SLE). Nie wiadomo, czy ta nieprawidłowość jest spowodowana defektem w limfocytach producenta, czy też nadmierną supresją. Podajemy, że usunięcie komórek OKT8 (Leu 2a) + zwiększyło produkcję IL-2 przez stymulowane in vitro limfocyty do normalnego lub powyżej normalnego poziomu u 19 z 21 pacjentów z SLE. Ten wzrost był bardziej widoczny u pacjentów z klinicznie nieaktywną chorobą i / lub otrzymujących mniej niż 7,5 mg prednizonu. Usunięcie komórek OKT8 + z normalnych nie zwiększyło znacząco aktywności IL-2. Read more „Korekta wytwarzania interleukiny-2 u pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym przez usunięcie spontanicznie aktywowanych komórek supresorowych.”

Badania nad prawidłową i przewlekłą chorobą ziarniniakową neutrofili wskazują na korelację tyrozynolowania tubuliny z komórkowym stanem redoks.

Specyficzna stymulacja tyrozynolowania tubuliny w ludzkich leukocytach polimorfojądrowych (PMN) jest indukowana syntetycznym peptydowym chemoatraktantem, N-formylo-metionylo-leucylo-fenyloalaniną (fMet-Leu-Phe), a ta stymulacja tyrozynolowania w PMN jest całkowicie hamowana w obecność różnych czynników redukujących. Dalsze badania mające na celu scharakteryzowanie mechanizmu stymulacji tyrozynolowania w PMN wykazały, że warunki hamujące wybuch oddechowy stymulują PMN, np. Atmosferę beztlenową lub dodatek przeciwutleniaczy, takich jak cysteamina, azydek lub kwas 2,3-dihydroksybenzoesowy, również hamowały wywołaną peptydem stymulację tyrozynolowania w tych komórkach. Ponadto odczynnik sulfhydrylowy, N-etylomaleimid, powodował obniżoną tyrozyna- nację w spoczynkowym PMN i całkowicie hamował indukowaną przez FMet-Leu-Phe stymulację. W przeciwieństwie do tego dodatek diamidu, który preferencyjnie utlenia glutation komórkowy, znacznie pobudził tyrozynaję zarówno w spoczynkowym, jak i stymulowanym fMet-Leu-Phe PMN. Read more „Badania nad prawidłową i przewlekłą chorobą ziarniniakową neutrofili wskazują na korelację tyrozynolowania tubuliny z komórkowym stanem redoks.”

Nukleotydy adeninowe i 5-hydroksytryptamina uwalniane przez agregację płytek blokują neurotransmisję adrenergiczną w tętnicy wieńcowej u psów.

Celem tego badania było określenie wpływu substancji wazoaktywnych uwalnianych przez agregację płytek krwi na neuroprzekaźnictwo adrenergiczne w tętnicach wieńcowych u psów. Napięcie izometryczne rejestrowano w izolowanych odcinkach pierścienia tętnicy wieńcowej pozbawionych śródbłonka i mierzono uwalnianie [3H] noradrenaliny z pasków tętnicy wieńcowej preinkubowanych z radioznakowanym nadajnikiem. Przezścienna stymulacja pola elektrycznego i egzogennie dodana norepinefryna powodowały beta-adrenergiczne relaksacje pierścieni wieńcowych skurczonych przez prostaglandynę F2 alfa. W pierścieniach wieńcowych dodatkowo skurczone przez dodanie płytek agregujących w ilościach mniejszych niż obecne we krwi, reakcja na stymulację elektryczną została zahamowana, a wrażliwość na noradrenalinę zmniejszona. Stężenia mikromolowe dwufosforanu adenozyny, trifosforanu adenozyny i 5-hydroksytryptaminy były uwalniane przez płytki krwi w tych warunkach eksperymentalnych. Read more „Nukleotydy adeninowe i 5-hydroksytryptamina uwalniane przez agregację płytek blokują neurotransmisję adrenergiczną w tętnicy wieńcowej u psów.”

Biosynteza prostacykliny w hodowlanym śródbłonku naczyniowym jest ograniczona przez dezaktywację cyklooksygenazy.

Pierwotne monowarstwowe hodowle ludzkiego śródbłonka żyły pępkowej wytwarzają prostacyklinę (PGI2) w odpowiedzi na stymulację przez trombinę, jonofor A23187, kwas arachidonowy i endoperoksyd prostaglandynowy, PGH2. Żadna z tych obróbek nie miała istotnego wpływu na zdolność śródbłonka do wytwarzania PGI2 w odpowiedzi na późniejszą stymulację przez PGH2. Przeciwnie, śródbłonek wstępnie eksponowany na trombinę, A23187 lub kwas arachidonowy wytwarzał odpowiednio około 37, 68 i 84% mniej PGI2, po kolejnej stymulacji kwasem arachidonowym. Odkrycia te sugerują, że biosynteza PGI2 w hodowlanym śródbłonku powoduje dezaktywację cyklooksygenazy-hydroperoksydazy, ale nie syntezy PGI2. Aby przetestować hipotezę, że sama biosynteza PGI2 powoduje dezaktywację cyklooksygenazy, trombinę, A23187 i kwas arachidonowy dodano do monowarstw, które zostały wstępnie inkubowane z ibuprofenem (250 mikroM), szybko odwracalnym, konkurencyjnym inhibitorem tego enzymu. Read more „Biosynteza prostacykliny w hodowlanym śródbłonku naczyniowym jest ograniczona przez dezaktywację cyklooksygenazy.”

Mitochondrialny stres oksydacyjny po niedotlenieniu tlenku węgla w mózgu szczura.

Aby lepiej zrozumieć mechanizmy uszkodzenia tkanki podczas i po niedotlenieniu tlenku węgla (CO), badaliśmy wytwarzanie częściowo zredukowanego gatunku tlenu (PROS) w mózgach szczurów poddanych 1% CO przez 30 minut, a następnie ponownie natleniano w powietrzu dla 0-180 min. Przez określenie zależnej od H2O2 inaktywacji katalazy w obecności 3-amino-1,2,4-triazolu (ATZ), stwierdziliśmy zwiększoną produkcję H2O2 w przodomózgowiu po reoksygenacji. Lokalizacja katalazy w mikroperoksizomach mózgu wskazała na wewnątrzkomórkowe miejsce wytwarzania H2O2; późniejsze badania mitochondriów przodomózgowia izolowane podczas i po niedotlenieniu CO wiązały się z pobliskimi mitochondriami jako źródłem H2O2. W mitochondriach dwa okresy wytwarzania PROS były wskazywane przez zmniejszenie stosunku zredukowanego do utlenionego glutationu (GSH / GSSG). Te okresy stresu oksydacyjnego następowały bezpośrednio po ekspozycji na CO i 120 min po reoksygenacji, jak wskazano odpowiednio 50 i 43% spadkiem w GSH / GSSG. Read more „Mitochondrialny stres oksydacyjny po niedotlenieniu tlenku węgla w mózgu szczura.”

Metaboliczne losy ekstrahowanej glukozy w normalnym ludzkim mięśniu sercowym.

Glukoza jest ważnym substratem metabolizmu mięśnia sercowego. Celem tego badania było określenie wpływu krążących substratów metabolicznych na ekstrakcję glukozy w mięśniu sercowym oraz określenie metabolicznego losu glukozy w prawidłowym ludzkim mięśniu sercowym. Cewniki wieńcowe i cewniki tętnicze umieszczono u 23 zdrowych ochotników płci męskiej. [6-14C] Glukoza była infuzowana jako wskaźnik w 10 osobnikach. [6-14C] Glukozę i [U-13C] mleczan podawano jednocześnie z innymi 13 osobnikami. Read more „Metaboliczne losy ekstrahowanej glukozy w normalnym ludzkim mięśniu sercowym.”

Wzór genetycznej transmisji defektu leukocytów w śmiertelnej ziarniniakowej chorobie dzieciństwa

Test czynnościowy leukocytów-fagocytów, który okazał się nieprawidłowy u chłopców z śmiertelną ziarniniakową chorobą wieku dziecięcego, okazał się nieprawidłowy w stopniu pośrednim u ich matek. Dziewięć z dziewięciu matek okazało się nienormalnych, podczas gdy żaden z ośmiu ojców i żaden z pięciu zdrowych braci nie wykazywał wady. 10 z 16 rodzeństwa było anormalnych w takim samym stopniu jak ich matki, podobnie jak wszystkie trzy babcie ze strony matki, które były dostępne do nauki. Zakładając, że ten pośredni defekt funkcjonalny reprezentuje stan heterozygotyczny, dziewięć rodowodów rodzinnych jest całkowicie zgodnych z koncepcją, że cecha jest przenoszona na chromosomie X. Test histochemiczny barwnika-fagocytozy tetrazolium był również nieprawidłowy u samic-nosicieli i zapewnił niezależne potwierdzenie selekcji rodzeństwa, podejrzewanego o bycie nosicielem tej cechy. Read more „Wzór genetycznej transmisji defektu leukocytów w śmiertelnej ziarniniakowej chorobie dzieciństwa”