Przekierowanie metabolizmu endoperoksydazy prostaglandynowej w układzie płytkowo-naczyniowym u człowieka.

Prostacyklina (PGI2) jest inhibitorem funkcji płytek in vitro. Testowaliśmy hipotezę, że PGI2 powstaje w biologicznie aktywnych stężeniach na granicy płytek krwi i naczyń u człowieka i może być farmakologicznie modulowany, aby wzmocnić jego właściwości hamujące. Stało się to wykonalne, gdy opracowaliśmy technikę mikroquantitative, która umożliwia pomiar eikozanoidów w kolejnych 40-mikrolitrach porcji pełnej krwi wylanej z rany krwawiącej. U 13 zdrowych ochotników tempo wytwarzania tromboksanu B2 (TXB2) stopniowo wzrastało, osiągając maksymalnie 421 +/- 90 (średnia +/- SEM) fg / mikrolitrów na sekundę przy 300 +/- 20 s. Produkt hydratacji PGI2, 6-keto-PGF1 alfa, wzrósł wcześniej i w mniejszym stopniu, osiągając szczyt (68 +/- 34 fg / mikrolitrów na sekundę) przy 168 +/- 23 s. Read more „Przekierowanie metabolizmu endoperoksydazy prostaglandynowej w układzie płytkowo-naczyniowym u człowieka.”

Wydzielanie aktywności enzymatycznej chrząstki niszczącej proteoglikan przez mysie limfocyty T in vitro.

Zniszczenie chrząstki stawowej jest cechą zapalną artretydów. Enzymy opracowane przez komórki jednojądrzaste infiltrujące błonę maziową pośredniczą, częściowo, w degradacji macierzy zewnątrzkomórkowej chrząstki. Ponieważ komórki jednojądrzaste są dominującym typem komórek występującym w przewlekłym zapalnym zapaleniu błony maziowej, badaliśmy, czy interakcja immunologicznych komórek jednojądrzastych z antygenem zainicjowała syntezę i wydzielanie aktywności enzymatycznej degradującej proteoglikan. Aktywność enzymatyczną degradującą proteoglikan monitorowano przez zdolność kondycjonowanej pożywki mysiej śledziony do uwolnienia [3H] seryny / 35S04 wprowadzonej do frakcji monoglikanu chrzęstnej proteoglikanu (A1D1) i przez względną zmianę lepkości właściwej bydlęcego monomeru chrząstki proteoglikanu w chrząstce. Wyniki wykazały, że zarówno dziewicze, jak i immunologiczne komórki jednojądrzaste spontanicznie wytwarzały aktywność enzymatyczną degradującą proteoglikan oraz, że aktywacja i proliferacja komórek indukowana przez antygenową hemocyjaninę skałoczepa lub fitohemaglutyninę mitogenową nie była wymagana. Read more „Wydzielanie aktywności enzymatycznej chrząstki niszczącej proteoglikan przez mysie limfocyty T in vitro.”

Anty-idiotypowe przeciwciała przeciwko ludzkiemu wieloczynnikowemu reaktywnemu autoprzeciwciałowi. Wykrywanie idiotopów u zdrowych osób i pacjentów z chorobami autoimmunologicznymi.

Niedawno wyizolowaliśmy i scharakteryzowaliśmy ludzkie monoklonalne autoprzeciwciało, MOR-h1 (ludzki reagujący wiele narządów), które reaguje z antygenami w wielu narządach i wykazało, że to przeciwciało wiąże się z ludzkim hormonem wzrostu i białkiem o masie cząsteczkowej 35 000-mol. W niniejszym badaniu wygenerowaliśmy trzy monoklonalne przeciwciała antyidiotypowe (4E6, 3E5 i 3F6) przeciwko MOR-h1. Te antyidiotypowe przeciwciała reagowały specyficznie z MOR-h1, a nie z 26 innymi autoprzeciwciałami monoklonalnymi IgM reagującymi na wiele narządów, ani ze sprzężoną ludzką IgM (białkami szpiczaka). Wiązanie antyidiotypowych przeciwciał z MOR-h1 było hamowane zarówno przez ludzki hormon wzrostu, jak i przez białko 35000-molowe wagowo, co silnie sugeruje, że przeciwciała te reagują z epitopami w pobliżu lub w pobliżu paratopu na MOR-h1. Wyniki eksperymentów wiązania kompetycyjnego ujawniły, że epitop rozpoznawany przez 4E6 różni się od rozpoznanego przez 3E5 i 3F6. Read more „Anty-idiotypowe przeciwciała przeciwko ludzkiemu wieloczynnikowemu reaktywnemu autoprzeciwciałowi. Wykrywanie idiotopów u zdrowych osób i pacjentów z chorobami autoimmunologicznymi.”

Zmniejszona przyczepność leukocytów polimorficznych: FUNKCJA ZALEŻNA OD UWZGLĘDNIENIU CYKLICZNEGO AMP PRZEZ KOMÓRKI ENDOTELNE PO STYMULACJI ODTWARZACZY -REKRESÓW PRZEZ EPINEFRĘCJĘ

Aby zbadać biochemiczne i komórkowe podstawy wzrostu liczby leukocytów polimorfojądrowych (PMN) podczas podawania epinefryny, zbadano PMN od pacjentów otrzymujących adrenalinę pod kątem ich zdolności do przylegania do włókien nylonowych i monowarstw komórek śródbłonka. Po podaniu epinefryny liczba PMN wzrosła o 80% po 5 minutach, a izolowana przyczepność PMN do włókien nylonowych spadła z linii podstawowej 44-218-3%. W przeciwieństwie do tego, gdy osobnicy byli wlewani p -antagonistycznym propanololem przed otrzymaniem epinefryny, liczba PMN nie wzrastała, a adherencja PMN była normalna. Ekspozycja pojedynczych warstw komórek nabłonka PMN na epinefrynę 0,1. M doprowadziła do zmniejszonej adherencji PMN, która mogłaby być zablokowana przez 10. Read more „Zmniejszona przyczepność leukocytów polimorficznych: FUNKCJA ZALEŻNA OD UWZGLĘDNIENIU CYKLICZNEGO AMP PRZEZ KOMÓRKI ENDOTELNE PO STYMULACJI ODTWARZACZY -REKRESÓW PRZEZ EPINEFRĘCJĘ”

Wytwarzanie nadtlenku i zmniejszanie aktywności w ludzkich płytkach krwi.

Ludzkie płytki zawierają formy dysmutazy ponadtlenkowej (cytoplazmatyczne) i manganowe (mitochondrialne). Niemniej jednak, rodniki ponadtlenkowe były wykrywalne w otaczającym medium metabolicznie żywych zawiesin płytek krwi przy użyciu dwóch układów testowych: cytochromu c i nitroblue tetrazolium. Ilość nadtlenku wytworzonego przez płytki krwi (5 X 10 (5) rodniki ponadtlenkowe / płytka krwi na 10 min) była stała i nie wzrastała po agregacji przez czynniki takie jak kolagen i trombina. Układ generujący ponadtlenek był obecny w supernatancie zarówno płytek agregowanych, jak i spoczynkowych, a zatem nie był związany z płytkami krwi. Nie było wpływu na wytwarzanie nadtlenków płytek krwi po wcześniejszym spożyciu aspiryny, co wskazuje, że szlaki prostaglandyn i tromboksanu nie były zaangażowane. Read more „Wytwarzanie nadtlenku i zmniejszanie aktywności w ludzkich płytkach krwi.”

Autophagia wątroby w niekontrolowanej eksperymentalnej cukrzycy i jej związek z insuliną i glukagonem

Wiadomo, że egzogenny glukagon zwiększa lizosomy wątrobowe, ale nie zbadano zależności między poziomem endogennego glukagonu i insuliny a lizosomami wątrobowymi. W celu określenia, czy hormony wysp trzustkowych wpływają na rozwój tych organelli, gliogenezy, gęste ciała i autofagosomy były oznaczane morfometrycznie u normalnych szczurów, u szczurów z łagodną cukrzycą streptozotocyną z prawidłowym poziomem hormonów oraz u szczurów z ciężką cukrzycą streptozotocyną z hiperglikemią, hipo-insulinemia oraz kliniczne objawy niekontrolowanej cukrzycy i kwasicy ketonowej. W tej ostatniej objętości gęstość lizosomów wynosiła średnio 222,8 x 10-4 (SEM x 19,8 x 10-4), znacznie powyżej wartości kontrolnej 75 x 10-4 (SEM <7,0 x 10-4) (P <0,0005); glikogenosomy były nieobecne u chorych na cukrzycę, a wzrost ten był w dużej mierze wynikiem zwiększenia autofagosomów. Leczenie insuliną korygowało hiperglikemię, hipoinsulinemię i inne przejawy niekontrolowanej cukrzycy oraz zmniejszało gęstość objętościową lizosomów do 37,4 × 10-4 (SEM × 2,0 × 10-4), znacznie poniżej zarówno nieleczonych szczurów z cukrzycą, jak i osób bez cukrzycy (P <0,0025). W łagodnej cukrzycy streptozotocyny, w której nie występowała hiperglikemia, hipoinsulinemia i inne objawy niekontrolowanej cukrzycy, lizosomy wynosiły średnio 77,6 × 10-4 (SEM 5,5 × 10-4), nie różniące się od kontroli. Read more „Autophagia wątroby w niekontrolowanej eksperymentalnej cukrzycy i jej związek z insuliną i glukagonem”

Wpływ stałych wzrostów ciśnienia tętniczego na czas trwania wyrzutów lewej komory

Wpływ stałych wzrostów ciśnienia tętniczego na czas trwania czasu wyrzutu lewej komory badano u 11 zdrowych ochotników płci męskiej. Metoksaminę, aminę presyjną o przeważającej aktywności zwężającej naczynia, ale pozbawioną znaczącego efektu inotropowego, podawano dożylnie, co skutkowało średnim wzrostem średniego ciśnienia tętniczego o 27 mm Hg. Częstość akcji serca utrzymywała się na stałym poziomie dzięki wysokiej prawej stymulacji przedsionkowej i nie było istotnej zmiany pojemności minutowej serca. Podczas infuzji metoksaminy, gdy objętość wylewu, częstość akcji serca i stan inotropowy były utrzymywane na stałym poziomie, czas wyrzutu lewej komory zwiększał się wraz ze wzrostem średniego ciśnienia tętniczego. Wystąpiła wysoce znacząca korelacja między wzrostem średniego skurczowego ciśnienia krwi a wydłużeniem czasu wyrzutu lewej komory (r = 0,870). Read more „Wpływ stałych wzrostów ciśnienia tętniczego na czas trwania wyrzutów lewej komory”

Badania z użyciem ludzkich lizosomów leukocytów. Dowody na obecność przeciwciał anty-lizosomalnych w toczniu rumieniowatym i na obecność antygenu lizosomalnego w chorobach zapalnych.

Ludzkie lizosomy zostały wyizolowane z prawidłowych leukoyctes z krwi obwodowej i scharakteryzowane za pomocą mikroskopii elektronowej, analizy enzymatycznej i testów na DNA i RNA. Zebrane surowice od 37 niewyselekcjonowanych pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym (SLE), włączając aktywne i nieaktywne, leczone i nieleczone, testowano w reakcjach wiązania dopełniacza (CF) z tymi preparatami lizosomowymi. 23 Surowice SLE wykazywały pozytywne reakcje CR, podobnie jak surowice od dwóch pacjentów z lupoidalnym zapaleniem wątroby. Siedem surowic SLE o najsilniejszej reaktywności w CF również wykazało reakcje żelatyny strąceniowej z lizosomami. Nie obserwowano ani reakcji CF, ani strącania z lizosomami w normalnych surowicach ani z surowicami pacjentów z wywołanym lekami zespołem toczniowym, reumatoidalnym zapaleniem stawów (RA), zapaleniem wielomięśniowym lub autoimmunologiczną niedokrwistością hemolityczną. Read more „Badania z użyciem ludzkich lizosomów leukocytów. Dowody na obecność przeciwciał anty-lizosomalnych w toczniu rumieniowatym i na obecność antygenu lizosomalnego w chorobach zapalnych.”

Niskie dawki alfa-tokoferolu polepszają i alfa-tokoferol w dużych dawkach pogarsza działanie rozszerzające naczynia śródbłonkowe u królików karmionych cholesterolem.

Nieprawidłowości związane z zależnym od śródbłonka rozkurczem tętniczym rozwijają się we wczesnej fazie miażdżycy i mogą częściowo wynikać z działania zmodyfikowanej lipoproteiny o małej gęstości (LDL) na uwalnianie czynnika relaksującego związanego z agonistą śródbłonka (EDRF) i degradację EDRF. alfa-tokoferol (AT) to główny rozpuszczalny w lipidach przeciwutleniacz w ludzkim osoczu i lipoproteinach, w związku z tym zbadaliśmy wpływ AT na zależne od śródbłonka złagodzenie tętnicze u samców nowozelandzkich białych królików karmionych dietami zawierającymi (a) bez dodatku (kontrole) , (b) 1% cholesterolu (grupa cholesterolowa) lub 1% cholesterolu z (c) 1000 IU / kg chow AT (mała grupa AT) lub (d) 10 000 IU / kg chow AT (grupa AT z dużą dawką ). Po 28 dniach zbadano funkcję śródbłonka i podatność LDL na utlenianie za pośrednictwem miedzi w warunkach ex vivo. Awarie zależne od acetylocholiny i A23187 zależne od śródbłonka były istotnie upośledzone w grupie cholesterolu (P <0,001 vs. kontrola), ale zachowały się w grupie AT w małej dawce (P = NS vs. Read more „Niskie dawki alfa-tokoferolu polepszają i alfa-tokoferol w dużych dawkach pogarsza działanie rozszerzające naczynia śródbłonkowe u królików karmionych cholesterolem.”

Regulacja degranulacji i aktywacji eozynofilów przez endogenną fosfolipazę A2.

Unikalne ziarniste białka eozynofili mogą odgrywać rolę patogenną w astmie i w obronie przed inwazjami pasożytniczymi. Jednak mechanizmy regulujące degranulację eozynofili są w dużej mierze nieznane. Zbadaliśmy hipotezę, że uwalnianie tych białek jest regulowane przez endogenną aktywację fosfolipazy A2. Ludzkie eozynofile (HE) wyizolowano z krwi obwodowej 42 osobników albo przez rozdział gęstości Percoll albo przez frakcjonowanie immunomagnetyczne z negatywną selekcji. Aktywacja eozynofili została zapoczątkowana in vitro 10 (-6) M FMLP i 5 mikrogramów / ml cytochalasiny B i została oceniona za pomocą pomiaru peroksydazy eozynofilowej (EPO), leukotrienowej C4 (LTC4) i nadtlenkowej radykalnej (.O2-). Read more „Regulacja degranulacji i aktywacji eozynofilów przez endogenną fosfolipazę A2.”