Synteza kwasu żółciowego w izolowanej, rozdrobnionej wątrobie królika

Eksperymenty te przeprowadzono w celu wykazania przydatności perfundowanej wątroby królika do badań nad metabolizmem kwasów żółciowych oraz w celu określenia enzymu ograniczającego szybkość syntezy kwasów żółciowych. Króliki karmiono półsyntetyczną dietą, z dodatkiem 1% kolestyraminy lub bez niej, w kontrolowanych warunkach. Pod koniec 2-5 tygodnia, wątroby usunięto i perfundowano przez 2,5 godziny, stosując różne prekursory znakowane izotopem 14C do pomiaru syntezy kwasu cholowego de novo. Wątroby następnie analizowano pod kątem cholesterolu, a żółć zebraną podczas perfuzji analizowano pod kątem cholesterolu i kwasów żółciowych. Kontrolna żółć zawierała średnio 0,34 mg glikocholanu, 7,4 mg glikodeoksycholanu i 0,06 mg cholesterolu. Read more „Synteza kwasu żółciowego w izolowanej, rozdrobnionej wątrobie królika”

Kompleksy immunologiczne we wrodzonym i Natalowym zakażeniu wirusem cytomegalii

Występowanie krążących kompleksów immunologicznych badano u 31 pacjentów z zakażeniem wirusem cytomegalii (29 zakażonych w okresie płodowym i 2 z infekcją noworodkową) oraz 34 niezakażonymi kontrolami. Aktywność anty-komplementarna powyżej 1:20 wystąpiła w 34% (29/86) surowic testowanych z grupy zakażonej, w przeciwieństwie do 7,5% (3/40) w grupie kontrolnej (P <0,005). Przy badaniu za pomocą limfoblastoidalnej linii komórkowej (test komórek Raji) reaktywność w tych grupach wynosiła odpowiednio 45 (39/86) i 2,7% (1/36) (P <0,001). Korelacja wyników pomiędzy tymi dwoma testami zależnymi od dopełniacza wystąpiła w 75% próbek pobranych od zakażonej grupy. Częstotliwość reaktywności była wyższa w ciężkim zakażeniu wewnątrzmacicznym i podczas 1. Read more „Kompleksy immunologiczne we wrodzonym i Natalowym zakażeniu wirusem cytomegalii”

Paradoksalne działanie klofibratu na wątrobę i metabolizm mięśni u szczurów: INDUKCJA MYOTONII I ZMIANY KWASU TŁUSZCZOWEGO I UTLENIANIA GLUKOZY

Przewlekłe przyjmowanie klofibratu czasami powoduje zespół mięśniowy u człowieka. Zbadaliśmy wpływ przewlekłego podawania klofibratu u szczurów na aktywność elektryczną mięśnia szkieletowego (brzuchatego łydki), jego skład i utlenianie palmitynianu i glukozy. Efekty te zostały porównane z tymi w wątrobie. Clofibrate administration zmienił wzór elektromiograficzny mięśnia brzuchatego łydki (charakterystyka miotonii), zmniejszył zawartość białka i upośledził jego utlenianie palmitynianu i glukozy. Efekty te były zupełnie inne w wątrobie, ponieważ spożycie klofibratu zwiększało zawartość białka wątroby i utlenianie palmitynianu bez wpływu na utlenianie glukozy przez tę tkankę. Read more „Paradoksalne działanie klofibratu na wątrobę i metabolizm mięśni u szczurów: INDUKCJA MYOTONII I ZMIANY KWASU TŁUSZCZOWEGO I UTLENIANIA GLUKOZY”

Korekta wytwarzania interleukiny-2 u pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym przez usunięcie spontanicznie aktywowanych komórek supresorowych.

Produkcja interleukiny-2 (IL-2) in vitro ulega depresji u chorych na toczeń rumieniowaty układowy (SLE). Nie wiadomo, czy ta nieprawidłowość jest spowodowana defektem w limfocytach producenta, czy też nadmierną supresją. Podajemy, że usunięcie komórek OKT8 (Leu 2a) + zwiększyło produkcję IL-2 przez stymulowane in vitro limfocyty do normalnego lub powyżej normalnego poziomu u 19 z 21 pacjentów z SLE. Ten wzrost był bardziej widoczny u pacjentów z klinicznie nieaktywną chorobą i / lub otrzymujących mniej niż 7,5 mg prednizonu. Usunięcie komórek OKT8 + z normalnych nie zwiększyło znacząco aktywności IL-2. Read more „Korekta wytwarzania interleukiny-2 u pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym przez usunięcie spontanicznie aktywowanych komórek supresorowych.”

Specjalna terapia cytokinami narządowymi. Lokalna aktywacja fagocytów jednojądrzastych poprzez dostarczanie aerozolu rekombinowanego interferonu gamma do płuc człowieka.

W kontekście centralnej roli makrofagów pęcherzyków płucnych w obronie powierzchni nabłonkowej układu oddechowego oraz zdolności IFN-gamma do aktywacji fagocytów jednojądrzastych, ocenialiśmy strategie wykorzystania rIFN-gamma do aktywacji ludzkich makrofagów pęcherzyków płucnych in vivo. Aby to osiągnąć, rIFN-gamma podawano niepalącym normalom, ilości ilościowe IFN-gamma w surowicy i płynie nabłonka oddechowego (ELF) i status związanej z IFN-gamma aktywacji monocytów krwi i makrofagów pęcherzykowych oceniano przez ekspresja transkryptów mRNA IP-10, genu indukowanego specyficznie przez IFN-gamma. Po podaniu ogólnoustrojowym (podskórnie) maksymalnie tolerowanych ilości rIFN-gamma (250 mikrogramów) wykryto poziomy IFN-gamma w surowicy, ale nie ELF, ekspresję transkryptów IP-10 w monocytach krwi, ale nie makrofagów pęcherzykowych i wiele układowych niekorzystne skutki. Aby obejść niezdolność podawania ogólnoustrojowego do osiągnięcia wydolności oddechowej ELF i aktywować makrofagi pęcherzykowe, rIFN-gamma (250-1 000 mikrogramów) wdychano w postaci aerozolu raz dziennie przez 3 dni. Co uderzające, podczas gdy IFN-gamma nie wykryto w surowicy, było wykrywalne w oddechowym ELF w sposób zależny od dawki. Read more „Specjalna terapia cytokinami narządowymi. Lokalna aktywacja fagocytów jednojądrzastych poprzez dostarczanie aerozolu rekombinowanego interferonu gamma do płuc człowieka.”

Znacznie zahamowały aktywność 7-dehydrocholesterol-delta 7-reduktazy w mikrosomach wątroby z homozygotów Smitha-Lemli-Opitza.

Zbadaliśmy defekt enzymatyczny w biosyntezie późnego cholesterolu w zespole Smitha-Lemli-Opitza, recesywnie odziedziczonym zaburzeniu rozwojowym charakteryzującym się dysmorfizmem, upośledzeniem umysłowym i wrodzonymi anomaliami wielonarządowymi. Zmniejszone stężenie cholesterolu w osoczu i tkance z podwyższonymi stężeniami 7-dehydrocholesterolu to cechy biochemiczne diagnozujące odziedziczony defekt enzymu. Stosując testy wbudowywania izotopów, zmierzyliśmy transformację prekursorów, [3 alpha-3H] lathosterolu i [1,2-3H] 7-dehydrocholesterolu do cholesterolu przez mikrosomy wątroby z siedmiu kontroli i czterech homozygotycznych osobników Smith-Lemli-Opitz. Wprowadzenie podwójnego wiązania w lathosterolu w C-5 [6] w celu utworzenia 7-dehydrocholesterolu, który jest katalizowany przez 5-dehydrogenazę lathosterolu, było równie szybkie w kontrolnych i homozygotach mikrosomach wątrobowych (120 +/- 8 w porównaniu do 100 +/- 7). pmol / mg białka na minutę, P = NS). Read more „Znacznie zahamowały aktywność 7-dehydrocholesterol-delta 7-reduktazy w mikrosomach wątroby z homozygotów Smitha-Lemli-Opitza.”

Biosynteza prostacykliny w hodowlanym śródbłonku naczyniowym jest ograniczona przez dezaktywację cyklooksygenazy.

Pierwotne monowarstwowe hodowle ludzkiego śródbłonka żyły pępkowej wytwarzają prostacyklinę (PGI2) w odpowiedzi na stymulację przez trombinę, jonofor A23187, kwas arachidonowy i endoperoksyd prostaglandynowy, PGH2. Żadna z tych obróbek nie miała istotnego wpływu na zdolność śródbłonka do wytwarzania PGI2 w odpowiedzi na późniejszą stymulację przez PGH2. Przeciwnie, śródbłonek wstępnie eksponowany na trombinę, A23187 lub kwas arachidonowy wytwarzał odpowiednio około 37, 68 i 84% mniej PGI2, po kolejnej stymulacji kwasem arachidonowym. Odkrycia te sugerują, że biosynteza PGI2 w hodowlanym śródbłonku powoduje dezaktywację cyklooksygenazy-hydroperoksydazy, ale nie syntezy PGI2. Aby przetestować hipotezę, że sama biosynteza PGI2 powoduje dezaktywację cyklooksygenazy, trombinę, A23187 i kwas arachidonowy dodano do monowarstw, które zostały wstępnie inkubowane z ibuprofenem (250 mikroM), szybko odwracalnym, konkurencyjnym inhibitorem tego enzymu. Read more „Biosynteza prostacykliny w hodowlanym śródbłonku naczyniowym jest ograniczona przez dezaktywację cyklooksygenazy.”

Hamowanie transportu penicyliny z płynu mózgowo-rdzeniowego po wewnątrzszczepiennym zaszczepieniu bakterii

Wpływ wewnątrzcząsteczkowej inokulacji bakterii na układ splotu naczyniówkowego, który transportuje penicylinę z płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) do krwi, badano in vitro i in vivo. Zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych i splotu naczyniówkowego, jak również pleocytoza z CSF indukowano u królików inwazyjnymi dożylnie Hemophilus influenzae lub Staphylococcus aureus. W różnych czasach po inokulacji bakteryjnej, splot naczyniówki zaszczepionych królików usunięto i inkubowano w sztucznym CSF zawierającym penicylinę [14C]. Zdolność splotów naczyniówkowych do akumulacji pencyliny in vitro została zmierzona i stwierdzono jej obniżenie w porównaniu z kontrolą. To obniżenie wychwytu splotu naczyniówkowego odwróciło się wraz z ustąpieniem procesu zapalnego. Read more „Hamowanie transportu penicyliny z płynu mózgowo-rdzeniowego po wewnątrzszczepiennym zaszczepieniu bakterii”

Odpowiedź enzymu trzustkowego na płynny posiłek i stymulację hormonalną. Korelacja z poziomami sekretyny i cholecystokininy w osoczu.

Wytwarzanie trypsyny w trzustce i poziomy sekretiny w osoczu i cholecystokininy (CCK) zmierzono u pięciu zdrowych ochotników w celu zbadania mechanizmów zaangażowanych w regulację poposiłkowego wydzielania trzustkowego. Trzustka była stymulowana płynnym posiłkiem testowym lub przez dożylną sekretynę (1-82 pmol / kg-1 na h-1) lub caeruleinę, analog CCK (2,3-37 pmol / kg-1 na h-1), lub przez połączenie sekretyny i caeruleiny. Wydzielanie trzustki oceniano techniką perfuzji markera (glikol polietylenowy [PEG 4000]), sekretyny osocza i CCK za pomocą specyficznych testów radioimmunologicznych. Zwiększenie dawek sekretyny powodowało zwiększenie wydajności wodorowęglanów (P mniejsze niż 0,01), podczas gdy trypsyna nie była stymulowana ponad poziom podstawowy. Klasyfikowana kaeruleina powodowała skokowy wzrost wydajności trypsyny i wodorowęglanu (P poniżej 0,01). Read more „Odpowiedź enzymu trzustkowego na płynny posiłek i stymulację hormonalną. Korelacja z poziomami sekretyny i cholecystokininy w osoczu.”

Wzór genetycznej transmisji defektu leukocytów w śmiertelnej ziarniniakowej chorobie dzieciństwa

Test czynnościowy leukocytów-fagocytów, który okazał się nieprawidłowy u chłopców z śmiertelną ziarniniakową chorobą wieku dziecięcego, okazał się nieprawidłowy w stopniu pośrednim u ich matek. Dziewięć z dziewięciu matek okazało się nienormalnych, podczas gdy żaden z ośmiu ojców i żaden z pięciu zdrowych braci nie wykazywał wady. 10 z 16 rodzeństwa było anormalnych w takim samym stopniu jak ich matki, podobnie jak wszystkie trzy babcie ze strony matki, które były dostępne do nauki. Zakładając, że ten pośredni defekt funkcjonalny reprezentuje stan heterozygotyczny, dziewięć rodowodów rodzinnych jest całkowicie zgodnych z koncepcją, że cecha jest przenoszona na chromosomie X. Test histochemiczny barwnika-fagocytozy tetrazolium był również nieprawidłowy u samic-nosicieli i zapewnił niezależne potwierdzenie selekcji rodzeństwa, podejrzewanego o bycie nosicielem tej cechy. Read more „Wzór genetycznej transmisji defektu leukocytów w śmiertelnej ziarniniakowej chorobie dzieciństwa”