Insulina i glukoza jako modulatory indukowanego aminokwasami uwalniania glukagonu w izolowanej trzustce szczurów z cukrzycą z alloksanem i streptozotocyną.

Hiperglikonemia występująca in vivo u zwierząt chorych na cukrzycę z alloksanem lub streptozotocyną nie jest hamowana przez wysoki poziom glukozy, ale jest hamowana przez egzogenną insulinę. Te obserwacje razem z innymi badaniami sugerowały, że zależny od insuliny transport glukozy i metabolizm przez komórki alfa służy jako podstawowy mechanizm kontrolujący wydzielanie glukagonu. Ta hipoteza została przetestowana w obecnym dochodzeniu. Możliwe interakcje między glukozą, insuliną i mieszaniną 20 aminokwasów w fizjologicznych proporcjach zostały zbadane u szczurów z cukrzycą z izolowaną perfuzją. Uwalnianie insuliny i glukagonu stosowano jako wskaźniki funkcji komórki teta i komórki alfa. Read more „Insulina i glukoza jako modulatory indukowanego aminokwasami uwalniania glukagonu w izolowanej trzustce szczurów z cukrzycą z alloksanem i streptozotocyną.”

Kompleksy immunologiczne we wrodzonym i Natalowym zakażeniu wirusem cytomegalii

Występowanie krążących kompleksów immunologicznych badano u 31 pacjentów z zakażeniem wirusem cytomegalii (29 zakażonych w okresie płodowym i 2 z infekcją noworodkową) oraz 34 niezakażonymi kontrolami. Aktywność anty-komplementarna powyżej 1:20 wystąpiła w 34% (29/86) surowic testowanych z grupy zakażonej, w przeciwieństwie do 7,5% (3/40) w grupie kontrolnej (P <0,005). Przy badaniu za pomocą limfoblastoidalnej linii komórkowej (test komórek Raji) reaktywność w tych grupach wynosiła odpowiednio 45 (39/86) i 2,7% (1/36) (P <0,001). Korelacja wyników pomiędzy tymi dwoma testami zależnymi od dopełniacza wystąpiła w 75% próbek pobranych od zakażonej grupy. Częstotliwość reaktywności była wyższa w ciężkim zakażeniu wewnątrzmacicznym i podczas 1. Read more „Kompleksy immunologiczne we wrodzonym i Natalowym zakażeniu wirusem cytomegalii”

Izolacja ludzkiej izoformy cytosolowej fosfolipazy A2 z serca. Oznaczanie metodą wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej metodą spektroskopii masowej i odwróconej fazy wysokociśnieniowej substratów glicerofosfolipidowych choliny i etanoloaminy.

Niedawne badania wykazały istnienie nowej rodziny niezależnych od wapnia plazmasmowych fosfolipaz A2 w psowatym mięśniu sercowym, które uważa się za enzymatyczne mediatory uszkodzenia błony niedokrwiennej. Obecnie donosimy, że ludzki miokardium zawiera dwie funkcjonalnie różne izoformy fosfolipazy A2 niezależnej od wapnia. Główna izoforma fosfolipazy A2 preferencyjnie hydrolizuje substrat plazmonowy, ma optimum pH 7,0 i jest chromatograficznie rozdzielna od mniejszej cytozolowej niezależnej od wapnia izoformy fosfolipazy A2, która hydrolizuje substraty plazminilocholiny i fosfatydylocholiny z podobnymi szybkościami i ma optymalne pH wynoszące 8,5. Główną cytozolową niezależną od wapnia izoformę fosfolipazy A2 zidentyfikowano jako 40-kD polipeptyd po 182 000-krotnym oczyszczeniu przez sekwencyjne chromatografowanie kolumnowe do końcowej specyficznej aktywności 67 mumol / mg.min. Oczyszczona 40-kD ludzka fosfolipaza A2 z mięśnia sercowego preferencyjnie hydrolizuje plazmony zawierające kwas arachidonowy w pozycji sn-2. Read more „Izolacja ludzkiej izoformy cytosolowej fosfolipazy A2 z serca. Oznaczanie metodą wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej metodą spektroskopii masowej i odwróconej fazy wysokociśnieniowej substratów glicerofosfolipidowych choliny i etanoloaminy.”

Metabolizm pantetiny w cystynozie.

D-Pantethine jest koniugatem witaminy z kwasem pantotenowym i niskocząsteczkowej cysteaminy aminotiolowej. Pantetryna jest eksperymentalnym środkiem hipolipemicznym i została zasugerowana jako źródło cysteaminy w leczeniu cystynozy nefropatycznej. Leczymy cztery cystinotyczne dzieci 70-1 000 mg / kg na d-pantetynę doustną i badamy jej metabolizm. Pantetynę szybko hydrolizowano do kwasu pantotenowego i cysteaminy; nie mogliśmy wykryć pantetiny w osoczu po podaniu doustnym. Odpowiedzialny enzym, pantetheinazy , był bardzo aktywny w homogenatach błony śluzowej jelita cienkiego i osocza. Read more „Metabolizm pantetiny w cystynozie.”

Specjalna terapia cytokinami narządowymi. Lokalna aktywacja fagocytów jednojądrzastych poprzez dostarczanie aerozolu rekombinowanego interferonu gamma do płuc człowieka.

W kontekście centralnej roli makrofagów pęcherzyków płucnych w obronie powierzchni nabłonkowej układu oddechowego oraz zdolności IFN-gamma do aktywacji fagocytów jednojądrzastych, ocenialiśmy strategie wykorzystania rIFN-gamma do aktywacji ludzkich makrofagów pęcherzyków płucnych in vivo. Aby to osiągnąć, rIFN-gamma podawano niepalącym normalom, ilości ilościowe IFN-gamma w surowicy i płynie nabłonka oddechowego (ELF) i status związanej z IFN-gamma aktywacji monocytów krwi i makrofagów pęcherzykowych oceniano przez ekspresja transkryptów mRNA IP-10, genu indukowanego specyficznie przez IFN-gamma. Po podaniu ogólnoustrojowym (podskórnie) maksymalnie tolerowanych ilości rIFN-gamma (250 mikrogramów) wykryto poziomy IFN-gamma w surowicy, ale nie ELF, ekspresję transkryptów IP-10 w monocytach krwi, ale nie makrofagów pęcherzykowych i wiele układowych niekorzystne skutki. Aby obejść niezdolność podawania ogólnoustrojowego do osiągnięcia wydolności oddechowej ELF i aktywować makrofagi pęcherzykowe, rIFN-gamma (250-1 000 mikrogramów) wdychano w postaci aerozolu raz dziennie przez 3 dni. Co uderzające, podczas gdy IFN-gamma nie wykryto w surowicy, było wykrywalne w oddechowym ELF w sposób zależny od dawki. Read more „Specjalna terapia cytokinami narządowymi. Lokalna aktywacja fagocytów jednojądrzastych poprzez dostarczanie aerozolu rekombinowanego interferonu gamma do płuc człowieka.”

Wpływ katecholamin, ćwiczeń i nitrogliceryny na prawidłowe i niedokrwienne miokardium u świadomych psów

Wpływ izoproterenolu, norepinefryny, dobutaminy, aktywności fizycznej i nitrogliceryny na średnicę, ciśnienie, szybkość skurczu, dP / dt, dP / dt / P, ciśnienie tętnicze, przepływ krwi wieńcowej z lewej strony i opór naczyń wieńcowych badano w zdrowe przytomne psy z prawidłową perfuzją wieńcową i tymi samymi zwierzętami po umiarkowanym globalnym niedokrwieniu wywołano częściową niedrożnością lewej głównej tętnicy wieńcowej. W normalnym sercu bez niedokrwienia wszystkie interwencje poprawiły wydajność lewej komory, o czym świadczyły wzrosty dP / dt / P i prędkości przy tej samej lub dolnej lewej końcoworozmiarowej średnicy lewej komory. Interwencje, które w normalnym sercu powodowały duży wzrost częstości akcji serca i kurczliwości mięśnia sercowego, np. Izoproterenol i ćwiczenia, lub które obniżały ciśnienie perfuzji wieńcowej, np. Nitroglicerynę lub izoproterenol, wywoływały paradoksalne reakcje w umiarkowanym globalnym niedokrwieniu, tj. Read more „Wpływ katecholamin, ćwiczeń i nitrogliceryny na prawidłowe i niedokrwienne miokardium u świadomych psów”

Zawartość receptora androgenowego w normalnej i hiperplastycznej psiej prostacie

Opracowano procedurę pomiaru receptorów androgenowych w cytoplazmatycznych ekstraktach z gruczołów od nienaruszonych psów. Protokół wykorzystywał analizę saturacji wymiany w 15 ° C z użyciem syntetycznego androgenowego R1881 (17 (3-hydroksy-17P-metyrystra-4,9,11-trien-3-onu) jako sondy ligandu i ilościowo wykrytego całkowitego cytoplazmatycznego receptora androgenu ( Rc, receptor pozbawiony androgenów i RcA, receptor zajętości androgenu) obecny na początku testu. Protokół ten zastosowano w połączeniu z procedurą analizy saturacji tkanki (do ilościowego oznaczenia jądrowego receptora androgenowego) w celu ilościowego oznaczenia całkowitej zawartości receptora androgenowego w prawidłowych i rozrostowych gruczołach krokowych uzyskanych od młodego (w wieku 2,5- lub 4,6-latka) i wieku (12,5-latka). stare) rasowe psy o znanej randze. Całkowita zawartość cytoplazmatycznego receptora androgenu (pikomoli na prostatę) w hiperplastycznych gruczołach krokowych była 4,6-krotnie większa niż w prawidłowych prostatach. Read more „Zawartość receptora androgenowego w normalnej i hiperplastycznej psiej prostacie”

Hamowanie transportu penicyliny z płynu mózgowo-rdzeniowego po wewnątrzszczepiennym zaszczepieniu bakterii

Wpływ wewnątrzcząsteczkowej inokulacji bakterii na układ splotu naczyniówkowego, który transportuje penicylinę z płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) do krwi, badano in vitro i in vivo. Zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych i splotu naczyniówkowego, jak również pleocytoza z CSF indukowano u królików inwazyjnymi dożylnie Hemophilus influenzae lub Staphylococcus aureus. W różnych czasach po inokulacji bakteryjnej, splot naczyniówki zaszczepionych królików usunięto i inkubowano w sztucznym CSF zawierającym penicylinę [14C]. Zdolność splotów naczyniówkowych do akumulacji pencyliny in vitro została zmierzona i stwierdzono jej obniżenie w porównaniu z kontrolą. To obniżenie wychwytu splotu naczyniówkowego odwróciło się wraz z ustąpieniem procesu zapalnego. Read more „Hamowanie transportu penicyliny z płynu mózgowo-rdzeniowego po wewnątrzszczepiennym zaszczepieniu bakterii”

Szczur jelitowy Sekrety Tarczowe lipoproteiny o dużej gęstości

Lipoproteiny o wysokiej gęstości wyizolowano z połączonej surowicy szczurzej i krezkowej limfy szczurów przetoki limfatycznej. W większości eksperymentów podczas gromadzenia limfy dodano kwas 5,5 (3-ditiionitrobenzoesowy, inhibitor enzymu acylotransferazy lecytyna: cholesterol, aby zapobiec modyfikacji składu lipidów nowo wydzielanych lipoprotein. W wyniku negatywnego barwienia mikroskopu elektronowego lipoprotein o dużej gęstości limfatycznej odkryto cząstki dyskoidalne (190. 3 x 55. 1.), Które miały tendencję do tworzenia rouleaux, występowały również mniejsze sferyczne cząstki. Read more „Szczur jelitowy Sekrety Tarczowe lipoproteiny o dużej gęstości”

Rozwój przeciwciał monoklonalnych przeciwko mucynie okrężnicy. Charakterystyka wielu gatunków mucynów okrężnicy.

Strukturalne związki między komórkami mucynowymi okrężnicy oceniano za pomocą biblioteki przeciwciał monoklonalnych (Mab) skierowanych przeciwko oczyszczonej ludzkiej mucynie okrężnicy (HCM). Po immunizacji myszy oczyszczoną mucyną z prawidłowej ludzkiej błony śluzowej okrężnicy, 14% z 1920 poddanych badaniu produktów fuzji było dodatnich pod względem aktywności anty-HCM w teście na fazie stałej. Wzorce selektywnego wiązania przez hybrydoma sześciu odrębnych gatunków HCM (I-VI) oddzielonych chromatografią DEAE-celulozową sugerowały obecność zarówno uwarunkowanych, jak i gatunkowych determinant antygenowych wśród HCM gatunków I-VI. 23 MAbs anty-HCM (7 IgM, 7 IgG1 i 9 IgG2) wykazujące różnorodność swoistości dla gatunku anty-HCM, zostały wytworzone i wykorzystane do zbadania strukturalnych związków między gatunkami mucyny. Wiązanie różnych mucyn poprzez indywidualne MAbs anty-HCM wykazano za pomocą konkurencyjnego testu radioimmunologicznego w fazie stałej dla odzwierciedlenia obecności identycznych epitopów na różnych gatunkach. Read more „Rozwój przeciwciał monoklonalnych przeciwko mucynie okrężnicy. Charakterystyka wielu gatunków mucynów okrężnicy.”