Właściwości kinetyczne antagonisty Na + / H + limfocytów szczura z samoistnym nadciśnieniem tętniczym: rola pH wewnątrzkomórkowego.

Wzmożona aktywność antagonisty Na + / H + jest coraz częściej opisywana jako cecha komórek pochodzących od osób z nadciśnieniem, ale nie badano zależnej od jego aktywności wewnątrzkomórkowej zależności (pH) od aktywności. Badanie to zostało zaprojektowane w celu scharakteryzowania właściwości kinetycznych antyportu Na + / H + w limfocytach od dorosłych samców szczurów z nadciśnieniem samoistnym (SHR) i tych z kontrolowanych wiekowo, normotensyjnych kontroli Wistar-Kioto (WKY). Stężenie ipH w stanie równowagi, oszacowane na podstawie pomiaru fluorescencji BCECF, było znacząco niższe w limfocytach SHR niż u szczurów WKY (odpowiednio 7,09 . 0,02, n = 17 i 7,17 . 0,03, n = 19), P mniej niż 0,025). Read more „Właściwości kinetyczne antagonisty Na + / H + limfocytów szczura z samoistnym nadciśnieniem tętniczym: rola pH wewnątrzkomórkowego.”

Wydzielanie aktywności enzymatycznej chrząstki niszczącej proteoglikan przez mysie limfocyty T in vitro.

Zniszczenie chrząstki stawowej jest cechą zapalną artretydów. Enzymy opracowane przez komórki jednojądrzaste infiltrujące błonę maziową pośredniczą, częściowo, w degradacji macierzy zewnątrzkomórkowej chrząstki. Ponieważ komórki jednojądrzaste są dominującym typem komórek występującym w przewlekłym zapalnym zapaleniu błony maziowej, badaliśmy, czy interakcja immunologicznych komórek jednojądrzastych z antygenem zainicjowała syntezę i wydzielanie aktywności enzymatycznej degradującej proteoglikan. Aktywność enzymatyczną degradującą proteoglikan monitorowano przez zdolność kondycjonowanej pożywki mysiej śledziony do uwolnienia [3H] seryny / 35S04 wprowadzonej do frakcji monoglikanu chrzęstnej proteoglikanu (A1D1) i przez względną zmianę lepkości właściwej bydlęcego monomeru chrząstki proteoglikanu w chrząstce. Wyniki wykazały, że zarówno dziewicze, jak i immunologiczne komórki jednojądrzaste spontanicznie wytwarzały aktywność enzymatyczną degradującą proteoglikan oraz, że aktywacja i proliferacja komórek indukowana przez antygenową hemocyjaninę skałoczepa lub fitohemaglutyninę mitogenową nie była wymagana. Read more „Wydzielanie aktywności enzymatycznej chrząstki niszczącej proteoglikan przez mysie limfocyty T in vitro.”

Anty-idiotypowe przeciwciała przeciwko ludzkiemu wieloczynnikowemu reaktywnemu autoprzeciwciałowi. Wykrywanie idiotopów u zdrowych osób i pacjentów z chorobami autoimmunologicznymi.

Niedawno wyizolowaliśmy i scharakteryzowaliśmy ludzkie monoklonalne autoprzeciwciało, MOR-h1 (ludzki reagujący wiele narządów), które reaguje z antygenami w wielu narządach i wykazało, że to przeciwciało wiąże się z ludzkim hormonem wzrostu i białkiem o masie cząsteczkowej 35 000-mol. W niniejszym badaniu wygenerowaliśmy trzy monoklonalne przeciwciała antyidiotypowe (4E6, 3E5 i 3F6) przeciwko MOR-h1. Te antyidiotypowe przeciwciała reagowały specyficznie z MOR-h1, a nie z 26 innymi autoprzeciwciałami monoklonalnymi IgM reagującymi na wiele narządów, ani ze sprzężoną ludzką IgM (białkami szpiczaka). Wiązanie antyidiotypowych przeciwciał z MOR-h1 było hamowane zarówno przez ludzki hormon wzrostu, jak i przez białko 35000-molowe wagowo, co silnie sugeruje, że przeciwciała te reagują z epitopami w pobliżu lub w pobliżu paratopu na MOR-h1. Wyniki eksperymentów wiązania kompetycyjnego ujawniły, że epitop rozpoznawany przez 4E6 różni się od rozpoznanego przez 3E5 i 3F6. Read more „Anty-idiotypowe przeciwciała przeciwko ludzkiemu wieloczynnikowemu reaktywnemu autoprzeciwciałowi. Wykrywanie idiotopów u zdrowych osób i pacjentów z chorobami autoimmunologicznymi.”

Wydolność lewej komory i przepływ wieńcowy po embolizacji naczyń wieńcowych z mikrosferami z tworzywa sztucznego

Przepływ wieńcowy, obwód lewej komory i ciśnienie w lewej komorze obserwowano w izowolumalnie kurczącym się, wyizolowanym psim sercu podtrzymywanym przez krew tętniczą od dawcy. Ciśnienie skurczowe, częstość akcji serca i ciśnienie perfuzji wieńcowej utrzymywano na stałym poziomie, podczas gdy tętno wieńcowe stopniowo embolizowano za pomocą dużych (średnio 865.) Lub małych (średnio 10.) Mikrosfer polistyrenowych. Podczas embolizacji dużymi mikrosferami przepływ wieńcowy stopniowo się zmniejszał. Po wystarczającej embolizacji, zmniejszenie wydajności komorowej było wskazywane przez wzrost ciśnienia końcowego diastolicznego. Podczas embolizacji za pomocą małych mikrosfer początkowo zwiększał się przepływ wieńcowy, co sugeruje skuteczne uwalnianie substancji rozszerzającej naczynia krwionośne. Read more „Wydolność lewej komory i przepływ wieńcowy po embolizacji naczyń wieńcowych z mikrosferami z tworzywa sztucznego”

Wytwarzanie nadtlenku i zmniejszanie aktywności w ludzkich płytkach krwi.

Ludzkie płytki zawierają formy dysmutazy ponadtlenkowej (cytoplazmatyczne) i manganowe (mitochondrialne). Niemniej jednak, rodniki ponadtlenkowe były wykrywalne w otaczającym medium metabolicznie żywych zawiesin płytek krwi przy użyciu dwóch układów testowych: cytochromu c i nitroblue tetrazolium. Ilość nadtlenku wytworzonego przez płytki krwi (5 X 10 (5) rodniki ponadtlenkowe / płytka krwi na 10 min) była stała i nie wzrastała po agregacji przez czynniki takie jak kolagen i trombina. Układ generujący ponadtlenek był obecny w supernatancie zarówno płytek agregowanych, jak i spoczynkowych, a zatem nie był związany z płytkami krwi. Nie było wpływu na wytwarzanie nadtlenków płytek krwi po wcześniejszym spożyciu aspiryny, co wskazuje, że szlaki prostaglandyn i tromboksanu nie były zaangażowane. Read more „Wytwarzanie nadtlenku i zmniejszanie aktywności w ludzkich płytkach krwi.”

Autophagia wątroby w niekontrolowanej eksperymentalnej cukrzycy i jej związek z insuliną i glukagonem

Wiadomo, że egzogenny glukagon zwiększa lizosomy wątrobowe, ale nie zbadano zależności między poziomem endogennego glukagonu i insuliny a lizosomami wątrobowymi. W celu określenia, czy hormony wysp trzustkowych wpływają na rozwój tych organelli, gliogenezy, gęste ciała i autofagosomy były oznaczane morfometrycznie u normalnych szczurów, u szczurów z łagodną cukrzycą streptozotocyną z prawidłowym poziomem hormonów oraz u szczurów z ciężką cukrzycą streptozotocyną z hiperglikemią, hipo-insulinemia oraz kliniczne objawy niekontrolowanej cukrzycy i kwasicy ketonowej. W tej ostatniej objętości gęstość lizosomów wynosiła średnio 222,8 x 10-4 (SEM x 19,8 x 10-4), znacznie powyżej wartości kontrolnej 75 x 10-4 (SEM <7,0 x 10-4) (P <0,0005); glikogenosomy były nieobecne u chorych na cukrzycę, a wzrost ten był w dużej mierze wynikiem zwiększenia autofagosomów. Leczenie insuliną korygowało hiperglikemię, hipoinsulinemię i inne przejawy niekontrolowanej cukrzycy oraz zmniejszało gęstość objętościową lizosomów do 37,4 × 10-4 (SEM × 2,0 × 10-4), znacznie poniżej zarówno nieleczonych szczurów z cukrzycą, jak i osób bez cukrzycy (P <0,0025). W łagodnej cukrzycy streptozotocyny, w której nie występowała hiperglikemia, hipoinsulinemia i inne objawy niekontrolowanej cukrzycy, lizosomy wynosiły średnio 77,6 × 10-4 (SEM 5,5 × 10-4), nie różniące się od kontroli. Read more „Autophagia wątroby w niekontrolowanej eksperymentalnej cukrzycy i jej związek z insuliną i glukagonem”

Receptory przedsionkowego peptydu natriuretycznego są obniżone w nerkach szczurów z cukrzycą indukowaną streptozotocyną.

Aby określić, czy w odpowiedzi na obniżoną odpowiedź nerkową na przedsionkowy peptyd natriuretyczny (ANP) w przebiegu cukrzycy pośredniczyły zmiany w nerkowym receptorze ANP, gęstość receptora ANP i powinowactwo mierzono 17-20 dni po wstrzyknięciu streptozotocyny i porównywano z wartościami w traktowanych podłożem kontrolach i streptozotocynie. – leczone szczury otrzymywały euglikemię z insuliną. Stężenie ANP w osoczu było istotnie większe u szczurów z hiperglikemią niż u kontrolnych lub euglicemicznych szczurów z cukrzycą. Zarówno w kłębuszkach, jak iw rdzeniu wewnętrznym, stała dysocjacji receptora ANP nie różniła się pomiędzy trzema badanymi grupami, podczas gdy maksymalna zdolność wiązania uległa znacznemu zmniejszeniu u cukrzyków z hiperglikemią w porównaniu z grupą kontrolną i cukrzycą euglicemiczną. Również u szczurów z cukrzycą z hiperglikemią stwierdzono zmniejszenie liczby receptorów klirensu nerkozastępczego w porównaniu ze szczurami z cukrzycą kontrolną i euglicemiczną. Read more „Receptory przedsionkowego peptydu natriuretycznego są obniżone w nerkach szczurów z cukrzycą indukowaną streptozotocyną.”

Badania z użyciem ludzkich lizosomów leukocytów. Dowody na obecność przeciwciał anty-lizosomalnych w toczniu rumieniowatym i na obecność antygenu lizosomalnego w chorobach zapalnych.

Ludzkie lizosomy zostały wyizolowane z prawidłowych leukoyctes z krwi obwodowej i scharakteryzowane za pomocą mikroskopii elektronowej, analizy enzymatycznej i testów na DNA i RNA. Zebrane surowice od 37 niewyselekcjonowanych pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym (SLE), włączając aktywne i nieaktywne, leczone i nieleczone, testowano w reakcjach wiązania dopełniacza (CF) z tymi preparatami lizosomowymi. 23 Surowice SLE wykazywały pozytywne reakcje CR, podobnie jak surowice od dwóch pacjentów z lupoidalnym zapaleniem wątroby. Siedem surowic SLE o najsilniejszej reaktywności w CF również wykazało reakcje żelatyny strąceniowej z lizosomami. Nie obserwowano ani reakcji CF, ani strącania z lizosomami w normalnych surowicach ani z surowicami pacjentów z wywołanym lekami zespołem toczniowym, reumatoidalnym zapaleniem stawów (RA), zapaleniem wielomięśniowym lub autoimmunologiczną niedokrwistością hemolityczną. Read more „Badania z użyciem ludzkich lizosomów leukocytów. Dowody na obecność przeciwciał anty-lizosomalnych w toczniu rumieniowatym i na obecność antygenu lizosomalnego w chorobach zapalnych.”

Niskie dawki alfa-tokoferolu polepszają i alfa-tokoferol w dużych dawkach pogarsza działanie rozszerzające naczynia śródbłonkowe u królików karmionych cholesterolem.

Nieprawidłowości związane z zależnym od śródbłonka rozkurczem tętniczym rozwijają się we wczesnej fazie miażdżycy i mogą częściowo wynikać z działania zmodyfikowanej lipoproteiny o małej gęstości (LDL) na uwalnianie czynnika relaksującego związanego z agonistą śródbłonka (EDRF) i degradację EDRF. alfa-tokoferol (AT) to główny rozpuszczalny w lipidach przeciwutleniacz w ludzkim osoczu i lipoproteinach, w związku z tym zbadaliśmy wpływ AT na zależne od śródbłonka złagodzenie tętnicze u samców nowozelandzkich białych królików karmionych dietami zawierającymi (a) bez dodatku (kontrole) , (b) 1% cholesterolu (grupa cholesterolowa) lub 1% cholesterolu z (c) 1000 IU / kg chow AT (mała grupa AT) lub (d) 10 000 IU / kg chow AT (grupa AT z dużą dawką ). Po 28 dniach zbadano funkcję śródbłonka i podatność LDL na utlenianie za pośrednictwem miedzi w warunkach ex vivo. Awarie zależne od acetylocholiny i A23187 zależne od śródbłonka były istotnie upośledzone w grupie cholesterolu (P <0,001 vs. kontrola), ale zachowały się w grupie AT w małej dawce (P = NS vs. Read more „Niskie dawki alfa-tokoferolu polepszają i alfa-tokoferol w dużych dawkach pogarsza działanie rozszerzające naczynia śródbłonkowe u królików karmionych cholesterolem.”

Ocena opsonin z paciorkowcami grupy B w surowicy ludzkiej i króliczej metodą chemiluminescencji neutrofilów.

Czynniki istotne w obronie gospodarza przed paciorkowcami grupy B nie są dobrze poznane. Rola przeciwciał i dopełniacza w zapobieganiu poważnym zakażeniom przez te organizmy nie jest znana, ponieważ jak dotąd nie opracowano rzetelnej miary funkcjonalnej aktywności opsonicznej. Niedawno wykazano, że neutrofile wytwarzają chemiluminescencję po spożyciu cząstek stałych i że to zdarzenie można wykryć i określić ilościowo w ciekłym układzie scyntylacyjnym. Zaadaptowaliśmy procedurę chemiluminescencji, aby zbadać hiperimmunizowaną i ludzką surowicę królika na obecność opsonin z paciorkowcami grupy B. Paciorkowce grupy B typu Ia, II i III, które były opsonizowane w surowicy homologicznej, ale nie heterologicznej, wytwarzały pik w chemiluminescencji po dodaniu do normalnych ludzkich neutrofili. Read more „Ocena opsonin z paciorkowcami grupy B w surowicy ludzkiej i króliczej metodą chemiluminescencji neutrofilów.”